核酸杂交技术的应用

来源: 发布时间：2014-10-14  

用核酸杂交技术检测食源性致病菌的研究在很早之前就已经开始,主要包括膜上印迹杂交和核酸原位杂交两种,目前国内外也已开发出多种基因探针。早在1990年K?hler等就发现用负责编码单核细胞增生李斯特菌p60蛋白的iap基因作为DNA探针,可以用来检测单核细胞增生李斯特菌。Kerdahi等使用自动化酶连接的非放射性DNA探针,迅速准确地检测出了单核细胞增生李斯特菌。
　　Cheng等利用PCR反应扩增后的DNA探针,成功地从相同血清型的单核细胞增生李斯特菌里区分出流行克隆ⅡⅡ(EC)菌株;在这项研究中,他们选定的DNA探针来自于ECⅡ菌株H7828染色体的四个不同的基因组区域。陈倩等使用针对ESIEC大肠杆菌HPI毒力岛基因设计的rp-z探针,成功地鉴定出了ESIEC大肠杆菌。Knight等用特异性的DNA探针对纽约港口处水中的沙门氏菌进行检测,并对该探针的灵敏度、干扰因素等做了分析。除此之外,目前已经有很多商品化的基因探针试剂盒上市。
　　核酸杂交技术具有特异性好、敏感性高、诊断速度快、操作较为简便等特点。但由于需要用到放射性同位素等的标记,成本高,对人体的危害大等,使之成为核酸探针技术发展的局限所在。随着生物传感器的发展,核酸杂交技术也趋于与其相结合,以提高效率及经济效益等。

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