分析氨基酸的电化学方法
来源: 发布时间:2014-11-27
1 直接电分析法
利用部分种类氨基酸在电极上发生氧化反应时所呈现出的电活性,可直接对上述氨基酸进行测定。有研究报道,不经衍生化处理即可利用直接电分析法测定色氨酸、酪氨酸、胱氨酸、半胱氨酸和酩氨酸的含量。
2 间接电分析
(1)衍生化反应间接测定
多数种类氨基酸在金属电极上是非电活性的,无法直接测定。但采用衍生化反应将上述氨基酸转化成电活性的物质后即可进行间接测定。如非电活性的赖氨酸与芳醛进行衍生化反应后,在约0.3mo1/L的磷酸盐缓冲溶液中(pH=11),衍生化产物于峰电位1.12V处在滴汞电极上产生灵敏吸附还原波,其导数波高与赖氨酸浓度有良好的线性关系,检测限为3×10-8mol/L。
(2)氨基酸与金属离子配位反应间接测定
氨基酸作为配体可与多种金属离子配位,形成的电活性配合物可提高氨基酸自身的检测灵敏度。Gilbert等使用Co2+催化半胱氨酸产生氢波来测定胱氨酸和半胱氨酸,检出限达5×10-8mol/L和5×10-9mol/L。
(3)电致发光分析
电致发光分析的原理是具有电致发光活性的物质在一定的电位条件下,可与溶液中存在的敏化还原性物质作用,所生成的不稳定激发态回至基态时可产生发光,发光强度与被测物含量具有固定的比例关系。碱性条件下,氨基酸对次氯酸钠-鲁米诺发光体系的增敏作用显著,郎惠云等基于此原理建立了反相流动注射-发光测定氨基酸的新方法。该方法不需对氨基酸进行衍生或转化,检出限为0.016μg/mL,采样频率为150次/h,对1μg/mL的组氨酸进行连续12次平行测定的RSD为0.9%。上一条: 氨基酸的色谱分析法
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