氨基酸分析的准确度与精密度
来源: 发布时间:2014-11-11
(1)准确度在方法研究中,氨基酸分析的准确度常以下述几种方法来衡量,兵有理论值,顺序仪测定值或其它文献值为纯蛋白的回收率试验,添加回收率试验,即布特定基质中加入一定量的某氛基酸,测定后以添加量或提取测定量为聋劝计算回收率,线性响应检验,即将两种已知氨基酸含量的样品按一定的比例混合起头,测定后比较测定值与顶期值的吻合程度。
国内外常用做回收率试验的纯蛋白有牛血清蛋白、溶菌酶、酪蛋白、青霉素酶、核糖核酸酶等。纯蛋白可同时测知多种氨基酸的回收郭。
美国AO一AC则证明胧氨酸回收率为95%〔范围91一101%)、蛋氨酸回收率为100%(范围93一106%)Mason等人还用大麦加鱼粉、玉米加大豆粉和草粉加酪蛋白测定了氧化水解法中氨基酸的线性响应,证明一般氨基酸均可在饲料组分相对比例变化时·做出线性响应,蛋氨酸有时会忽略有些小的偏差,酷氨峻则在纤维性材料中产·生非线性响应。
在实际应用中,氨基酸分析的所谓准确度标准和要求可很不相同,应根据清况区别付待,一般可大体分为三类,一铂大多数临床分析中所关心的是正常样品与病理样品的差一异,因此测定能得到满意的再现性就行了,二在蛋白质结沟分析中,要求得到蛋白各氨基酸的确切比例,因此测定组分相对比例稳定即可,前处理中样品用量的差异,浓度的少许变化和进样量可不必过于严格,三食品饲料的营养分析中则需测出各氨基酸的准确的绝对含量。前处理及仪器参数的控制均需十分严格。
(2)精密度氨基酸分析的精密度反映对同一样品测定的一致性和稳定性,一般用一靛复性和再现性表示。统计常以实验室间联合试验的宗内与室问变异系蟹来衡鼠。自1951年以来,一世界上共进行了蛋白水解液联含试验19次,牛理休液一次。
WIlliams曾对一只1年以前的各次试验与结果做了详尽的分析,在此仅对1983年以后报导的六次联合试哈情况及其结果做一简单的介绍。1983年Sarwar等组织了美国、加拿大的七个实验室对酪蛋白、蛋白粉、牛肉、小麦和豌豆等七个样品进行常规水解,氧化水解和碱解并用离子交换色谱测定包析眺、蛋和色氨酸在内的各种氨基酸的情况。上一条: 氨基酸的紫外光检测
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